大鯢(Andrias davidianus Blanchard)屬大型兩棲綱、有尾目、隱鰓鯢科,是國家二級保護動物,有活化石之稱。大鯢皮膚腺體主要有粘液腺和顆粒腺兩種,粘液腺細胞可釋放粘糖蛋白,與水結合后成為黏液,覆蓋在上皮游離面,形成了一道天然的防護屏障。
大鯢皮膚顆粒腺體能夠分泌一種具有特殊性氣味的白色粘液,其成分是含有抗菌肽、糖蛋白等功能復雜多樣的藥理活性物質,對廣普抗菌、抗氧化、抗疲勞、抗腫瘤等起著非常明顯的作用。其實早在2015年,就有機構對大鯢皮膚粘液抗肺癌活性成分有所研究了,獲得了非常多的研究數據,下面跟我們一起來看看吧!
01 大鯢皮膚粘液組份分析。通過對大鯢皮膚粘液中糖、脂肪、蛋白質主要成分進行檢測表明,大鯢粘液中總糖含量為3.69%;粗脂肪含量為4.25%,含11種脂肪酸成分,總氨基酸含量達83.97%,含17種氨基酸成分。
02大鯢粘液糖蛋白的提取分離及純化。通過對堿提取工藝的各個步驟的考察,并以糖蛋白抗腫瘤生物活性為前提,最后確定了大鯢粘液糖蛋白提取工藝。通過提取得到一種相對比較純的糖蛋白組分,經SDS蛋白電泳檢測,該組分糖蛋白為單一組分,其分子量約為30KDa。
03大鯢粘液糖蛋白組成成分分析。本研究通過高效液相色譜和氨基酸自動分析儀對大鯢粘液糖蛋白的單糖組分和氨基酸組分進行了分析。最終確定大鯢粘液糖蛋白中含有6種單糖組分,其摩爾比為甘露糖(Man):葡萄糖醛(GlcUA):半乳糖醛酸(GalUA):N-乙酰氨基葡萄糖(GlcN):葡萄糖(Glc):半乳糖(Gal) = 1.71:4.12:1.09:1.55:1.01:2.09。04大鯢粘液糖蛋白體外抗肺癌活性研究。通過體外MTT實驗檢測大鯢粘液糖蛋白對人肺腺癌細胞A549生長有抑制作用。隨著培養時間的延長,大鯢粘液糖蛋白對A549細胞的抑制作用明顯增大,其抑制作用在一定濃度范圍內有時間依賴性。粘液糖蛋白與陽性對照紫杉醇相比較對A549細胞增殖抑制作用差異極顯著。
創新點:
① 利用自制大鯢粘液采集器的方法,能夠無損傷大鯢皮膚,對其進行粘液采集,為大鯢粘液資源的開發利用提供了原料保證;
④ 首次建立了PMP柱前衍生化高效液相色譜法分析大鯢粘液糖蛋中單糖組分,該方法準確可靠,靈敏度較高,對大鯢皮膚粘液糖蛋白的單糖組分都能得到較好的分離效果。
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